Öz

Giriş ve

Amaç: Doğum öncesi tanı için en sık endikasyon, fetusda artmış trizomi 21 riskidir. Bu çalışmada, trizomi 21’in hızlı doğum öncesi tanısında QF-PCR tekniğinin klinik uygulanabilirliğinin gösterilmesi amaçlandı. Ayrıca, bu teknikle trizomi tanısı koyabilmek için gerekli en az hücre sayısı ve bu değerin gebelik haftalarıyla ilişkisi değerlendirildi. Olgular ve

Yöntem: 224 gebeye ait amniyon sıvısında hücre sayımı yapıldı ve gebelik haftalarına göre sınıflandırıldı. Amniyon sıvısında bulunan total ve canlı hücre sayısı ile canlı hücre oranının gebelik haftasıyla istatistiksel olarak anlamlı bir ilişkisi olduğu (p<0.001) gösterildi. 135 olgudan DNA ayrımı yapıldı. DNA örnekleri D21S1411 belirleyici ile QF-PCR kullanılarak çoğaltıldı.

Bulgular: Normal örneklerin pik oranı ortalama 1.1 ve trizomik diallelik örneklerin pik oranları 2.0 olarak hesaplandı. 14–22. gebelik haftaları arasında 0.1–1.9 ml amniyon sıvısından elde edilen amniyosit sayısının QF-PCR ile tanı koymak için yeterli olduğu gösterilmiştir. QF-PCR testinin trizomi 21’i teşhis etmede duyarlılığının %90, seçiciliğinin %93.6, pozitif ve negatif öngörü değerlerinin ise %100 olduğu hesaplanmıştır. D21S1411 belirleyicinin heterozigozite oranının ise 0.8320 olduğu gösterilmiştir. Sonuç ve

Tartışma: D21S1411 belirleyicinin Türk toplumunda trizomi 21 tanısı için güvenle kullanılabileceği sonucuna varılmıştır. QF-PCR analizi, trizomi 21’in hızlı tanısında uygulanabilecek yardımcı bir testtir. Daha fazla sayıda belirleyici ile çalışmak, testin duyarlılığını artıracaktır.

Anahtar Kelimeler: Trizomi 21, QF-PCR, doğum öncesi tanı, amniyosit

Kaynakça

  1. Nussbaum RL, McInnes RR, Willard HF. Tıbbi Genetik. Doç. Dr. Boduroğlu K, ed; Prenatal Tanı (içinde). İstanbul: Güneş Kitabevi, 2005:359–374.
  2. Pertl B, Pieber D, Lercher-Hartlieb A, Orescovic I, Haeusler M, Winter R, Kroisel P, Adinolfi M. Rapid prenatal diagnosis of aneuploidy by quantitative fluorescent PCR on fetal samples from mothers at high risk for chromosome disorders. Mol Hum Reprod. 1999;5:1176–1179.
  3. Elles R, Mountford R. Molecular Diagnosis of Genetic Diseases. In: Mann K. Prenatal Detection of Chromosome Aneuplodiy by Quantitative Fluorescence-PCR, 2nd ed. Totowa, New Jersey: Humana Pres, 2004:141– 156.
  4. Yang YH, Nam MS, Yang ES. Rapid prenatal diagnosis of trisomy 21 by real-time quantitative polymerase chain reaction with amplification of small tandem repeats and S100B in chromosome 21. Yonsei Med J. 2005;46:193- 197.
  5. Putzova M, Soldatova I, Pecnova L, Dvorakova L, Jencikova N, Goetz P, Stejskal D. QF-PCR-based prenatal detection of common aneuploidies in the Czech population: five years of experience. Eur J Med Genet. 2008;51:209- 218.
  6. Aksakoğlu G. Sağlıkta Araştırma ve Çözümleme. İzmir: D.E.Ü. Rektörlük Basımevi, 2006:294-295.
  7. Lee MH, Ryu HM, Kim DJ, Lee BY, Cho EH, Yang JH, Kim MY, Han JY, Park SY. Rapid prenatal diagnosis of down syndrome using quantitative flu- orescent PCR in uncultured amniocytes. J Korean Med Sci, 2004;19:341- 344.
  8. Sun X, Yan M, Zhang Y, Zhou X, Wang C, Zheng F, Xiong C. Practical application of fluorescent quantitative PCR on Trisomy 21 in Chinese Han population. Mol Biol Rep 2006;33:167–173.
  9. Zimmermann B, Holzgreve W, Wenzel F, Hahn S. Novel real-time quantita- tive PCR test for trisomy 21. Clin Chem. 2002;48:362–363.
  10. Cirigliano V, Ejarque M, Fuster C, Adinolfi M. X chromosome dosage by quantitative fluorescent PCR and rapid prenatal diagnosis of sex chromoso- me aneuploidies. Mol Hum Reprod. 2002;8:1042–1045.
  11. Mann K, Ogilvie C, Donaghue C, Mountford R, Mcanulty C, Warner J, Dunlop N, Levett L, Hardy C, McConnell C, Diack J, McKay F. QF-PCR for the diagnosis of aneuploidy. ACC Best Practice Guidelines. 2005.
  12. Rebello MT, Hackett G, Smith J, Loeffler FE, Robson S, MacLachlan N, Beard RW, Rodeck CH, Williamson R, Coleman DV, Williams C. Extraction of DNA from amniotic fluid cells for the early prenatal diagnosis of genetic disease. Prenatal Diagnosis 1991;11:41-46.
  13. Cirigliano V, Sherlock J, Conway G, Quilter C, Rodeck C, Adinolfi M. Rapid detection of chromosomes X and Y aneuploidies by quantitative fluorescent PCR. Prenat Diagn. 1999;19:1099–1103.
  14. Cirigliano V, Lewin P, Szpiro-Tapies S, Fuster C, Adinolfi M . Assessment of new belirleyicis for the rapid prenatal detection of aneuploidies by quantita- tive fluorescent PCR (QF-PCR). Ann. Hum. Genet. 2001;65:421–427.
  15. Machatkova M, Brouckova M, Matejckova M, Krebsova A, Sperling K, Vorsanova S, Kutsev S, Zerova T, Arbuzova S, Krejci R, Petersen M, Macek M Sr. QF-PCR examination of parental and meiotic origin of trisomy 21 in central and eastern Europe. J Histochem Cytochem 2005;53:371-373.
  16. Nakonieczny M, Jezierski G, Woźniak I, Liss J, Pawłowski R, Preis K, Swiatkowska-Freund M, Wójcikowski C, Łukaszuk K. Prenatal diagnosis of fetal chromosomal aneuploidies using quantitative fluorescent PCR (QF- PCR). Przegl Lek. 2008;65:119-121.
  17. Nussbaum RL, McInnes RR, Willard HF. Tıbbi Genetik. Prof. Dr. Ayter Ş, ed; Populasyonlarda Genetik Değişimler (içinde). İstanbul: Güneş Kitabevi, 2005:98-99.
  18. Andonova S, Vazharova R, Dimitrova V, Mazneikova V, Toncheva D, Kremensky I. Introduction of the QF-PCR analysis for the purposes of rena- tal diagnosis in Bulgaria, estimation of applicability of 6 STR belirleyicis on chromosomes 21 and 18. Prenat Diagn. 2004;24:202–208.
  19. Cirigliano V, Voglino G, Cañadas M.P, Marongiu A, Ejarque M, Ordoñez E, Plaja A, Massobrio M, Todros T, Fuster C, Campogrande M, Egozcue J, Adinolfi M . Rapid prenatal diagnosis of common chromosome aneuploidies by QF-PCR. Assessment on 18,000 consecutive clinical samples. Mol Hum Reprod 2004;10:839-846.
  20. Yoon HR, Park YS, Kim YK. Rapid prenatal detection of Down and Edwards syndromes by fluorescent polymerase chain reaction with short tandem repe- at belirleyicis. Yonsei Med J. 2002;43:557-566.
  21. Sherlock J, Cirigliano V, Petrou M, Tutschek B, Adinolfi M. Assessment of diagnostic quantitative fluorescent multiplex polymerase chain reaction as- says performed on single cells. Ann Hum Genet. 1998;62:9–23.
  22. Samura O, Sohda S, Jhonson KL, Pertl B, Ralston S, Delli-Bovi LC, Bianchi DW. Diagnosis of trisomy 21 in fetal nucleated erythrocytes from maternal blood by use of short tandem repeat sequences. Clin Chem 2001;47:1622- 1626.
  23. Heinrich M, Müller M, Rand S, Brinkmann B, Hohoff C. Allelic drop-out in the STR system ACTBP2 (SE33) as a result of mutations in the primer binding region. Int J Legal Med 2004;118:361-363.
  24. Mann K, Ogilvie CM. Prenatal detection of chromosome disorders. Lancet 2001;358:1646.
  25. Hulten MA, Dhanjal S, Pertl B. Rapid and simple prenatal diagnosis of com- mon chromosome disorders: advantages and disadvantages of the molecular methods FISH and QF-PCR. Reproduction. 2003;126:279-297.
  26. Brun JL, Gangbo F, Wen ZQ, Galant K, Taine L, Maugey-Laulom B, Roux D, Mangione R, Horovitz J, Saura R. Prenatal diagnosis and management of sex chromosome aneuploidy: a report on 98 cases. Prenat Diagn. 2004;24:213– 218.

Telif hakkı ve lisans

Telif hakkı © 2010 Yazar(lar). Açık erişimli bu makale, orijinal çalışmaya uygun şekilde atıfta bulunulması koşuluyla, herhangi bir ortamda veya formatta sınırsız kullanım, dağıtım ve çoğaltmaya izin veren Creative Commons Atıf Lisansı (CC BY) altında dağıtılmıştır.

Nasıl atıf yapılır

1.
Eker HK, Altungöz O, Sakızlı M, Altıntaş N. Down Sendromunun Hızlı Doğum Öncesi Tanısında D21S1411 Kısa Tandem Tekrar (STR) Belirteci Kullanılarak Kantitatif Floresan Polimeraz Zincir Reaksiyonu (QF-PCR) Tekniğinin Etkinliğinin Değerlendirilmesi. Turk J Pediatr Dis. 2010;4(3):140-149.